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液相色谱法测定动物组织中抗生素残留量

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液相色谱法测定动物组织中抗生素残留量

    液相色谱法测定动物组织中抗生素残留量采用EDTA+磷酸(1+1)-三氯乙酸提取,应用C18固定柱富集、净化,以取得较好的分离效果。然后以保留时间定性,以峰面积定量。具体检测方法如下:

样品的提取

    四环素、土霉素的提取。称取10.0g样品于100mL比色管中,加入0.01mol/L EDTA二钠-0.04mol/l磷酸(1:1)混合液30mL,摇匀,再加入50%三氯乙酸2mL,摇匀,用EDTA-磷酸混合液定容至50mL,样品液全部转移至匀浆瓶中,用组织匀浆机高速匀浆1min,匀浆液于45℃以下水浴保温15min,待静置分层后,离心10min(2500r/min),上层清液过滤,收集滤液25mL备用。用2mL甲醇润湿Sep-Pak C18柱,字啊用10ml蒸馏水置换,然后依次用5%EDTA二钠水溶液5mL、10mL蒸馏水流过。将滤液通过Sep-Pak C18柱,分4次用10mL蒸馏水冲洗,加10mL甲醇溶出,溶出液用液相色谱仪分析。

 

氯霉素的提取。

    称取10.0g样品于100mL比色管中,加入磷酸盐缓冲液30mL,摇匀,慢慢加入50%三氯乙酸溶液,用磷酸盐缓冲溶液定容至50mL,样品液全部转移至匀浆瓶,用组织匀浆机高速匀浆1min,室温下放置15min,过滤,收集滤液,经0.45μm滤膜再过滤,取滤液进行液相色谱分析。

 

    测定后,比较其峰面积,利用外标法定量。

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