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液相色谱法测定食品中的激素含量

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食品中激素含量的测定——液相色谱法:样品中的激素经提取分离后,以液相色谱仪分离测定。利用保留时间定性,峰高或峰面积与标准比较定量。

    测定方法步骤:

1 提取

    取可食用部分,捣成匀浆,称取50g左右,置于250mL具塞锥形瓶中。加入内标物an眠酮20.00μg/mL贮备液1.0mL,再加甲醇-丙 酮(1:1)混合液150mL,在振荡器上振荡提取30min,过滤,残渣用少量甲醇-丙酮(1:1)混合液洗涤数次,洗涤并入滤液中,于旋转蒸发器或K-D浓缩器中将溶剂蒸除。残渣用20mL甲醇溶解,经盛有无水硫酸钠的漏斗滤入250mL分液漏斗中,再用10mL甲醇分数次洗涤漏斗及内容物,洗液并入滤液中。加pH=5.2的醋酸钠缓冲溶液80mL左右,混匀后分三次用二氯甲烷(50mL、30mL、30mL)振摇提取,合并提取液,并用无水硫酸钠脱水,在水浴上挥干溶剂。残渣用甲醇溶解并定容至10.0mL,混匀后,以3000r/min速度离心5min,取上层清液供色谱分析用。

2 色谱条件:

    色谱柱4.6mm×200mm;流动相:乙腈-甲醇-四氢呋喃-0.01mol/L醋酸钠溶液(20:20:10:50);流速1.0ml/min;测定波长270nm;进样体积10μL。

3 测定

    取供色谱用的样品溶液10μL,注入液相色谱仪,以内标法定量。

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关键词:气相色谱仪、原子吸收分光光度计、液相色谱仪 、原子荧光

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