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液相色谱仪进样方式

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液相色谱仪进样方式
 

液相色谱仪的进样装置要求密封性好,死体积小,重复性好,保证中心进样,进样时对色谱系统的压力和流量影响小。HPLC进样方式有隔膜进样、停流进样、阀进样和自动进样器进样等。

一、隔膜进样:

        用微量注射器将样品注入专门设计的与HPLC色谱柱相连的进样头内,可把样品直接送到色谱柱填充床的中心,死体积几乎等于零,可获得zui优柱效,且价格便宜,操作方便。但不能在高压下使用(如10MPa以上);隔膜容易吸附样品产生记忆效应,使进样重复性只能达到1%2%;能耐各种溶剂的橡皮不易找到,常规分析使用受到限制。

二、停流进样:

        可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新启动时往往会出现鬼峰;保留时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中,效果较好。

三、阀进样:

        HPLC分析常用六通阀,其关键部件由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。由于阀接头和连接管死体积的存在,柱效低于隔膜进样(约下降5%10%),但耐高压(3540MPa),进样量准确,重复性好(0.5%),操作方便。

  1、六通阀进样方式:

1)部分装液法进样:

        进样时,进样量应不大于定量环体积的50%(zui多75%),要求每次进样体积准确、相同。

        此法进样的准确度和重复性决定于注射器取样的熟练程度,而且易产生由进样引起的峰展宽。

2)完全装液法进样:

        进样时,进样量应不小于定量环体积的510 倍(zui少3倍),这样才能完全置换定量环内的流动相,消除管壁效应,确保进样的准确度和重复性。

  2、六通阀使用和维护注意事项:

1)样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤,以减少微粒对进样阀的磨损。

2)转动阀芯时不能太慢,更不能停留在中间位置。否则流动相受阻,使泵内压力剧增,甚至超过泵的zui大压力,再转到进样位时,过高的压力将使色谱柱损坏。

3)为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中,每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗,或先用能溶解样品的溶剂冲洗,再用水冲洗。

四、自动进样器进样:

        用于大量样品的常规分析。

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