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技术文章

水中苯胺和苯酚的液相色谱测定

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液相色谱荧光检测法测定环境水中苯胺和苯酚 

     苯胺是制造染料、药物的主要原料,进入人体后可造成急性中毒,引起高铁血红蛋白血症和肝、肾及皮肤损害。也可造成慢性中毒,长期低浓度接触可引起中毒性肝病。测定这2种物质的方法有分光光度法、荧光光度法 、可变角荧光法和液相色谱紫外检测法等。本文以液相色谱分离,以高选择性的荧光检测器进行检测,通过选用合适的分离条件,并采用检测波长的时间切换,样品不需要前处理,可对苯胺和苯酚同时测定,所用方法未见报道。方法可直接对环境水体中的苯胺和苯酚同时进行分析。

一、实验部分

1.仪器与试剂

(1)仪器:液相色谱系列(济南精测电子科技有限公司); 溶剂过滤系统, 超声波发生器

(2)试剂:甲醇为色谱纯,苯胺、苯酚、KH2PO4、Na2HPO4等试剂均为AR级,实验用水为去离子双蒸水

2.实验方法

   苯胺和苯酚标准溶液配制:将新蒸馏的苯胺和苯酚用去离子双蒸水分别配制成1.0mg/mL的标准储备液,避光冷藏。使用时分别稀释或者配制成1∶1混合标准溶液后稀释至所需质量浓度。

   样品测定:分别移取1.00mg/mL的苯胺和苯酚标准储备液,配制成质量浓度分别为0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,5.0μg/mL系列混合标准溶液,以选定的色谱条件进样测定,分别绘制苯胺和苯酚标准曲线。水样去除悬浮物(如出现混浊,离心取清液)进样测定,外标法定量,进样量均为20μL。

二、结果与讨论

1.分离条件选择

    苯胺和苯酚在不同pH下的荧光强度各不相 同,其原因主要是苯胺和苯酚的化学结构、离解作 用对荧光性质有影响。经使用多种流动相,并调整 为不同pH试验,以pH6.87磷酸盐缓冲液+甲醇(50∶50)为流动相,苯胺和苯酚均有较强的荧光。通过与ODS柱对比分析,使用EclipseXDB2C8柱,苯胺和苯酚的分离效果好、色谱峰对称。标准样品及工业废水样品的色谱图见图1

2.水样分析

    按试验方法对自来水、城市河水及化工厂未处理废水中的苯胺和苯酚进行了测定,并与荧光光度法测定结果作比较。结果见表1。


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